光度準(zhǔn)確度（ Photometric Accur acy ）在紫外可見分光光度計(jì)參數(shù)指標(biāo)中是一個(gè)非常重要的技術(shù)指標(biāo)。任何使用者購(gòu)買紫外可見分光光度計(jì)都是為了分析工作, 進(jìn)行分析工作的目的是出數(shù)據(jù), 其基本要求是數(shù)據(jù)要準(zhǔn)確、可靠, 這在很大程度上取決于儀器的光度準(zhǔn)確度這個(gè)*重要的技術(shù)指標(biāo)及其有關(guān)指標(biāo)。

 

一、光度準(zhǔn)確度的表示方法
   目前, 上對(duì)紫外可見分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度的表示方法主要有兩種:一種是吸光度準(zhǔn)確度（ Absorbance Accuracy ） 或吸光度誤差（ Absorbance Er ror ） , 用AA （或ΔA） 表示; 另一種是透射比準(zhǔn)確度（ Transmittance Accuracy） 或透射比誤差, 用TA （ 或ΔT） 表示。國(guó)外的紫外可見分光光度計(jì)制造商, 絕大多數(shù)都給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） , 并都指出在什么吸光度情況下測(cè)量。如美國(guó)Varian 公司的Cary500、美國(guó)P-E 公司的Lambda9、Lambda900 等儀器, 都給出在1. 0Ab s 時(shí), 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） 為±0. 003Ab s。但國(guó)外有少數(shù)儀器制造商在給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 的同時(shí), 還給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA（或ΔT）。如日本島津公司的UV-260等儀器, 都給出在吸光度為0～0. 5A 時(shí), 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 為±0. 002A; 吸光度為0. 5 ～ 1. 0A 時(shí), 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 為±0. 004A。但同時(shí)又給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （或ΔT） 為±0. 3% T。我國(guó)生產(chǎn)紫外可見分光光度計(jì)的廠商, 很多都在給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 的同時(shí), 也給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA（或ΔT）。如美析儀器有限公司的UV-1700、 VU-1800 、UV-1900系列, 北京瑞利公司的UV-2100 , 上海分析儀器總廠的760MC 等紫外可見分光光度計(jì)等, 在給出吸光度為0～0. 5A 時(shí), 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） 為±0. 002A;吸光度為0. 5 ～ 1. 0A 時(shí), 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA ） 為±0. 004A。但同時(shí)又給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （或ΔT） 為±0. 3%T。還有許多制造商只給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （或ΔT） , 并且不講明在多少透射比情況下測(cè)試, 這是不對(duì)的。我們認(rèn)為, 給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） , 同時(shí)也給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （或ΔT） 是對(duì)的。只給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） , 不給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （ 或ΔT） 也是可以的, 因?yàn)榉�合使用者只要求或只使用吸光度表示分析測(cè)試結(jié)果的習(xí)慣。只給透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （或ΔT） ,
而不給吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） 是不合適的, 原因如下: ,若給出TA （或ΔT） = ±0. 5%T, 而不講明在什么透射比情況下測(cè)試, 就應(yīng)理解為在0～100%T 范圍內(nèi)的任何地方測(cè)試都能達(dá)到TA （或ΔT） = ±0. 5% T。但實(shí)際上, 若在10% T 處測(cè)量, TA （ 或ΔT） = ±0. 5% T 時(shí)產(chǎn)生的透射比相對(duì)
誤差為±5%。而在90%T 處測(cè)量, 則TA （或ΔT） = ±0. 5% T 時(shí)產(chǎn)生的透射比相對(duì)誤差為±0. 56% , 二者相差很大。也就是說, 不可能在0～100%T 范圍內(nèi)的任何地方測(cè)試都能達(dá)到TA （或ΔT） = ±0. 5% T。第二, 用戶在使用紫外可見分光光度計(jì)時(shí), 基本上沒有人只用透射比T 和透射比誤差T A （ 或ΔT）來表示光度準(zhǔn)確度和分析測(cè)試誤差。相反, 大家一般都用吸光度值A(chǔ) 和吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） 來表示分析測(cè)試結(jié)果和分析誤差。第三, 為了與接軌, 應(yīng)采用吸光度值A(chǔ) 和吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） 來表示紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度。因?yàn)? 目前上絕大多數(shù)使用者, 都是采用吸光度值A(chǔ)和吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） 來表示紫外可見分光光度計(jì)的分析測(cè)試結(jié)果和分析誤差。第四, 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） 和透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （ 或ΔT） , 在使用時(shí)二者在數(shù)值上會(huì)相差很大。若要把TA（或ΔT） = ±0. 5% T 換算成AA （ 或ΔA） , 則在10% T 處（ 相當(dāng)在1A 處） ,±0. 5% T 的透射比誤差, 產(chǎn)生的AA （ 或ΔA ） 為±0. 022A, 而在90% T 處（相當(dāng)在0. 0046A 處） , TA （ 或ΔT） = ± 0. 5% T 時(shí)產(chǎn)生的AA （ 或ΔA） 為±0. 0024A, 這同樣是一個(gè)驚人的差距。因此, 在給出一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度時(shí), 不管是用吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 表示,還是用透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （ 或ΔT） 表示, 都應(yīng)該指出在多少吸光度或在多少透射比情況下測(cè)試。否則, 既會(huì)使人在物理概念上的含糊不清,又會(huì)給使用者帶來極大的麻煩。
    但是, 目前仍有許多廠商在給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （ 或ΔT）時(shí), 都一律寫成±0. 3% T。從理論上講任何高檔紫外可見分光光度計(jì)的透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （或ΔT） 不可能在0～100% T 內(nèi)都能達(dá)到±0. 3%T 的透射比準(zhǔn)確度。
    在紫外可見分光光度計(jì)的技術(shù)指標(biāo)表示方法上, 之所以產(chǎn)生錯(cuò)誤, 主要原因有兩個(gè): , 不甚了解透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA （或ΔT） 與透過率真值T 的關(guān)系, 不懂得吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 與吸光度真值A(chǔ) 的關(guān)系。不知道影響透射比誤差TA （或ΔT） 和吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 的主要因素。第二, 商業(yè)上的需要, 人家給出的都是± 0. 3% T （ 0 ～100% T） , 我如果不這樣寫, 就會(huì)影響銷售。
    目前國(guó)內(nèi)外都有一些廠商在說明書或儀器樣本中稱“ 光度準(zhǔn)確度” 為“ 測(cè)光精度”, 這種稱謂混淆了準(zhǔn)確度（ Accuuracy） 和精密度（ Pr ecision ） 的概念。準(zhǔn)確度是指的測(cè)量值與理論值之差, 該偏差越小說明測(cè)量的數(shù)據(jù)越準(zhǔn)確可靠, 或者說光度準(zhǔn)確度越高。而精密度是指的分析測(cè)試數(shù)據(jù)的離散性或重復(fù)性, 是指同一操作者, 在一次開機(jī)中連續(xù)重復(fù)多次測(cè)試某一吸收峰的吸光度值中與*小值之差。該差值越小, 說明該儀器的光度重復(fù)性越好。“ 光度準(zhǔn)確度” 和“ 光度精密度” 二者不能混淆。正確的說法應(yīng)該是紫外可見分光光度計(jì)的“ 光度準(zhǔn)確度” 而不能說成“ 測(cè)光精度”。
    還有人講“ 紫外可見分光光度計(jì)沒有準(zhǔn)確度, 光度精密度或光度重復(fù)性就是光度準(zhǔn)確度”。這也是一個(gè)錯(cuò)誤的。光度精密度或光度重復(fù)性是指多次測(cè)量中的離散性。如3 次或5 次測(cè)量中吸光度的值與*小值之差即為光度精密度或光度重復(fù)性。而準(zhǔn)確度則是指實(shí)際測(cè)量的吸光度值與真值或理論值之差。Owen 為了說明精密度（ Precision ） 和準(zhǔn)確度（ Accuuracy ） 的區(qū)別, 用打靶的例子作了精辟的說明（ 見圖4-1 ）。

 

 

 

二、影響光度準(zhǔn)確度的主要因素
    影響紫外可見分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度的主要因素有以下幾個(gè)方面。
    ① 儀器的雜散光大小。
    ② 儀器的光度噪聲。
    ③ 儀器的基線平直度。
    ④ 儀器的光譜帶寬。
    ⑤ 試樣的來源, 包括樣品的制備, 取樣的方法。
    ⑥ 樣品的制備, 包括稱量、容量、溶劑、試劑、pH 值、時(shí)間、溫度等。
    ⑦ 比色皿的性能等。
    由此可知, 光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 是一個(gè)綜合性的技術(shù)指標(biāo)。要使用紫外可見分光光度計(jì)測(cè)得準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù), 必須注重上述幾個(gè)方面的影響。否則, 不可能得到準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)。特別應(yīng)該指出的是, 在給出吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） , 同時(shí)也給出透射比誤差TA （ 或ΔT） 時(shí), 二者不能相互矛盾。
三、吸光度準(zhǔn)確度和透射比準(zhǔn)確度的關(guān)系
    比耳定律指出: ① A = - lg T, 故T = 10 - A ; ②C = （ - 1/ ab） lg T, 故T =10 - abc 。
    式①和式②中, A 為吸光度; T 為透射比; a 為摩爾吸光系數(shù); b 為光程;c 為被測(cè)試樣的濃度。由此可見, A、T、C 之間有著密切的關(guān)系。由于A 或T 的測(cè)量誤差可引起對(duì)被測(cè)試樣濃度C 的測(cè)量誤差。若設(shè)T 的誤差為T A （ 或ΔT） , 則可求出不同TA （ 或ΔT） 的情況下, 相對(duì)吸光度誤差A(yù)A/ A （ AA 為吸
光度真值A(chǔ) 與測(cè)量值A(chǔ)m 之差） 與A 的關(guān)系。或求出不同A 下AA/ A （ 或ΔA/ A） 與TA 的關(guān)系。
   作者研究了AA/ A 與TA 和A 的關(guān)系, 導(dǎo)出了AA/ A 與T A 和A 之間的關(guān)系的理論計(jì)算公式, 具有普遍的指導(dǎo)意義。

 

 

 

式（ 4-9 ） 為吸光度誤差A(yù)A 與吸光度真值A(chǔ) 和透射比絕對(duì)誤差T A 關(guān)系的理論計(jì)算公式。由此可見, AA 與A 和T A 的數(shù)學(xué)關(guān)系式比較復(fù)雜; 當(dāng)TA 一定時(shí),AA 可通過不同的A 求得; 當(dāng)A 一定時(shí), AA 可通過不同的TA 求得。圖4-2 透射比誤差ΔT（ TA ） 與吸光度誤差ΔA 和吸光度真值A(chǔ)0 的關(guān)系
    根據(jù)式（ 4-9 ） , 計(jì)算出了7 種透射比誤差下, 透射比誤差TA 與吸光度真值A(chǔ) 的關(guān)系（即分析測(cè)試結(jié)果的相對(duì)誤差） , 繪制了這6 條誤差曲線很適用, 可以覆蓋目前各國(guó)不同廠家制造的、各種不同類型和型號(hào)的紫外可見分光光度計(jì)的誤差關(guān)系。分析測(cè)試工作者只要知道自

 

 

 

             圖4-2 透射比誤差ΔT（ TA ） 與吸光度誤差ΔA 和吸光度真值A(chǔ)0 的關(guān)系

 

己使用的儀器的TA （ 制造商都會(huì)提供, 使用自己測(cè)試的數(shù)據(jù)） , 再根據(jù)使用者當(dāng)時(shí)測(cè)試的吸光度數(shù)據(jù), 就可以從圖4-2 查得使用者當(dāng)時(shí)所測(cè)數(shù)據(jù)因?yàn)閮x器的TA 而引起的相對(duì)誤差, 從而知道自己分析測(cè)試數(shù)據(jù)的可靠性。如某廠商給出的儀器指標(biāo)中, TA 為±0. 5% T , 而分析測(cè)試要求的準(zhǔn)確度為1% , 則可馬上從圖4-2 上查得該儀器肯定不能滿足自己的使用要求; 又如若儀器給出的TA 為±0. 3%T , 但分析測(cè)試要求的準(zhǔn)確度為1% （相對(duì)誤差） , 則可馬上從圖4-2 上查得該儀器因?yàn)門A 為±0. 3% T, 由于TA （或ΔT） 的限制, 即使其他因素不產(chǎn)生誤差, 它也只能滿足對(duì)吸光度為0. 25～0. 75A 的試樣的分析測(cè)試要求; 若試樣的吸光度< 0. 25A （濃度偏�。� , 或> 0. 75A （ 濃度偏高） 時(shí),則測(cè)量誤差都會(huì)超過1%。
   目前, 國(guó)內(nèi)外許多儀器廠商, 對(duì)光度準(zhǔn)確度這個(gè)非常關(guān)鍵的技術(shù)指標(biāo)經(jīng)常同時(shí)用兩種方法表示: 一種是AA （ 或ΔA） , 另一種是TA （ 或ΔT） , 但其中很多二者是自相矛盾的。如日本島津的UV-3101PC 型紫外可見分光光度計(jì),它給出的光度準(zhǔn)確度分別表示為: 吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） 為±0. 002A （0～0. 5A） ; ±0. 004A （ 0. 5～ 1. 0A ） ; 同時(shí)又給出透射比誤差TA （ 或ΔT） 為±0. 3% T。從圖4-2 可知, 這是一組自相矛盾的技術(shù)指標(biāo)。因?yàn)? 從圖4-2 可查到TA （ 或ΔT） 為±0. 3% T 時(shí), 若要求AA （ 或ΔA） 為±0. 002A, 則只能在0. 2A 內(nèi)（即在0～0. 2A） 才可達(dá)到。不可能在0～0. 5A 內(nèi)保證AA （ 或
ΔA） 為±0. 002A。同樣, TA （或ΔT） 為±0. 3%T 時(shí), 若要求AA （ 或ΔA）為±0. 004A, 則只能在0～0. 45A 內(nèi)才是可靠的。在試樣吸光度為0. 45A 以上時(shí), AA （ 或ΔA） 就超過± 0. 004A, 若在1. 0A 處, 則AA （ 或ΔA） =±0. 0128A, 超過±0. 004A 的3 倍左右。所以, 日本島津的UV-3101PC 型紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度指標(biāo)中, AA （ 或ΔA） 和TA （ 或ΔT） 是自相矛盾的。同樣, 日本日立的U-3400 型紫外可見分光光度計(jì)的這一指標(biāo)也和日本島津的UV-3101PC 一樣是自相矛盾的。而美國(guó)P-E 公司的Lambda 9 ,Lambda 900 , 美國(guó)Varian 公司的Cary5、Cary500 和Cary6000 ,美析MACY公司的UV-1700、 VU-1800 、UV-1900系列等給出的光度準(zhǔn)確度指標(biāo)AA （ 或ΔA） 為±0. 003A （ 1A ） ; TA （ 或ΔT） = ±0. 08% T。從圖4-2 可知, 二者比較一致。從表3-7 可查到: 在TA （ 或ΔT） = ±0. 08% T時(shí), AA （或ΔA） 為± 0. 0034A （ 1A ） 。所以, 美國(guó)P-E 公司的Lambda 9 ,Lambda 900 , 美國(guó)Varian 公司的Cary5、Cary500 和Cary6000、美析MACY公司的UV-1700、 VU-1800 、UV-1900系列等紫外可見分光光度計(jì)儀器給出的光度準(zhǔn)確度指標(biāo)AA （ 或ΔA） 為± 0. 003A （ 1A ） ; TA（或ΔT） = ±0. 08%T 是可靠的。
四、光度準(zhǔn)確度測(cè)試方法
    用于紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測(cè)試的材料, 應(yīng)該是純度高、穩(wěn)定性好的物質(zhì)。這些物質(zhì)中*主要的是鉻酸鉀（ K2 CrO4 , 一般在堿性溶液中）、重鉻酸鉀（ K2 Cr2 O7 , 一般在酸性溶液中） 、硝酸鉀、中性濾光片等。在堿性溶液中的鉻酸鉀是一種好材料, 但是因?yàn)楹�有堿性, 不能儲(chǔ)藏在普通玻璃容器中, 而需要儲(chǔ)藏在石英器皿中, 硝酸鉀本身不大穩(wěn)定。這些都限制了它們的使用。因此, 選擇易于純化又溶于酸性介質(zhì)中的物質(zhì), 并且它們的稀溶液也是很穩(wěn)定的。因此, 重鉻酸鉀的0. 005mol/ L H2 SO4 溶液經(jīng)常被使用。許多科學(xué)家認(rèn)為, 用紫外濾光片來測(cè)試紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度, 具有很大的優(yōu)點(diǎn)。因?yàn)樗鼈兊姆�(wěn)定性更好, 又便于攜帶, 還有許多優(yōu)點(diǎn)將在后面討論。紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測(cè)試方法, 目前國(guó)內(nèi)外各生產(chǎn)廠家作法不一, 其主要原因是各國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)不同; 如美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定: “選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)參比材料, 在規(guī)定的波長(zhǎng)處, 連續(xù)測(cè)10 個(gè)吸光度或透射比讀數(shù), 取10個(gè)讀數(shù)的平均值, 實(shí)際吸光度或透射比與觀測(cè)值的平均值之差, 即為光度準(zhǔn)確度”。美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定了計(jì)算光度準(zhǔn)確度的標(biāo)準(zhǔn)偏差S 的方法; 規(guī)定指出吸光度準(zhǔn)確度用AA 表示, 則有

 

 

 

式（ 4-10） 、式（ 4-11） 中, S 為標(biāo)準(zhǔn)偏差; Ai 或T i 為每次測(cè)量時(shí)吸光度或透射比的讀數(shù)值; Aa 或Ta 為吸光度或透射比的平均值; n 為測(cè)量次數(shù)（ 一般取5～7 次）。
   美國(guó)NBS 規(guī)定, 在可見區(qū)用930 標(biāo)準(zhǔn)片來測(cè)定光度準(zhǔn)確度, 其標(biāo)準(zhǔn)透射比值分別為10%、20%、30%的中性玻璃濾光片。規(guī)定還指出也可用NBS 的931 , 它是一種溶液。而在紫外區(qū)內(nèi), 則規(guī)定用NBS 的203 來測(cè)定光度準(zhǔn)確度; 它是一種標(biāo)準(zhǔn)透射比值分別為90%、30%、10% 熔融石英濾光片。此外,美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定在紫外區(qū)內(nèi), 用戶還可以自己配置高純度的化合物溶液來測(cè)定光度準(zhǔn)確度。為此, 美國(guó)NBS 已發(fā)布了鉻酸鉀（K2 CrO4 ）、重鉻酸鉀（ K2 Cr2 O7 ）等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可供選用。
    我國(guó)在1992 年制訂的紫外可見分光光度計(jì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定, 用重鉻酸鉀溶液來測(cè)試紫外區(qū)的光度準(zhǔn)確度, 并明確指出了測(cè)試波長(zhǎng)。在可見光區(qū)規(guī)定可用中性濾光片來檢測(cè)光度準(zhǔn)確度, 其標(biāo)準(zhǔn)片的透射比值分別為10%、20%、40%左右; 同時(shí)還規(guī)定在紫外可見整個(gè)區(qū)間, 都可用中性濾光片來檢測(cè)光度準(zhǔn)確度, 其標(biāo)準(zhǔn)片的透射比值也分別為10%、20%、40%左右。
    安徽省計(jì)量測(cè)試研究所和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心共同研制的紫外光區(qū)透射比標(biāo)準(zhǔn)濾光片, TA 優(yōu)于0. 2% , 穩(wěn)定性優(yōu)于0. 1% , 其測(cè)試波長(zhǎng)分別為270nm、293 nm 和350 nm, 相應(yīng)的透射比標(biāo)準(zhǔn)值各為11. 4%、3. 9%、52. 9%左右。用來測(cè)試日本島津公司的UV-260 紫外可見分光光度計(jì)和上海美析儀器有限公司生產(chǎn)的UV-1700型紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度, 具體操作時(shí),以空氣作參照, 對(duì)規(guī)定的波長(zhǎng)處各測(cè)7 次, 取其平均值, 與標(biāo)準(zhǔn)值相減, 則得到各規(guī)定的波長(zhǎng)處的TA 。而后, 取三個(gè)規(guī)定波長(zhǎng)中*差者作為被測(cè)紫外可見分光光度計(jì)儀器的透射比準(zhǔn)確度。再根據(jù)式（ 4-2 ） , 求得被測(cè)儀器在各規(guī)定的波長(zhǎng)處的透射比準(zhǔn)確度, 然后以三個(gè)規(guī)定波長(zhǎng)中的*差者作為被測(cè)儀器的透射比準(zhǔn)確度。
    影響紫外分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度的因素很多, 主要因素有雜散光、噪聲、基線平直度、光譜帶寬等。

五、與光度準(zhǔn)確度有關(guān)的幾個(gè)重要問題
（ 一） 光度準(zhǔn)確度的測(cè)試材料
   美國(guó)NBS 規(guī)定測(cè)試材料可以是固體標(biāo)準(zhǔn)濾光片, 如930、203 標(biāo)準(zhǔn)片等,也可以是化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液, 如鉻酸鉀、重鉻酸鉀溶液等, 用戶可以任意選擇。我國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)也與NBS 相類似。各個(gè)國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)中, 都各自講明了固體和液體兩者的優(yōu)缺點(diǎn)。作者認(rèn)為固體標(biāo)準(zhǔn)濾光片比標(biāo)準(zhǔn)溶液好, 理由如下:
    ① 固體標(biāo)準(zhǔn)濾光片操作簡(jiǎn)單, 攜帶方便。
    ② 固體標(biāo)準(zhǔn)濾光片可以用空氣作參照, 避免了尋找理想?yún)⒄掌�基的麻煩�?br />    ③ 固體標(biāo)準(zhǔn)濾光片可以得到多個(gè)所需要的、較理想的峰或谷。如安徽省計(jì)量測(cè)試研究所研制的BW2018 標(biāo)準(zhǔn)片, 可以有兩個(gè)峰一個(gè)谷, 且分布均勻（270 nm、293nm、350 nm）。
    ④ 固體標(biāo)準(zhǔn)濾光片的標(biāo)準(zhǔn)片基本身可以吸收一部分雜散光, 在吸收（ 或透射） 峰的強(qiáng)度很小（ 或很大） 時(shí), 可以提高光度準(zhǔn)確度的測(cè)量準(zhǔn)確度。
（ 二） 光度準(zhǔn)確度與光譜帶寬的關(guān)系
    光譜帶寬是紫外分光光度計(jì)分析誤差的主要來源。一般來講, 目前國(guó)內(nèi)外的紫外分光光度計(jì)的儀器研究者或制造者, 在給出AA 或TA 時(shí), 都不講明在什么光譜帶寬（ SBW） 條件下測(cè)量, 這是不對(duì)的。
    A. Owen 在1988 年指出: “吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確度, 取決于儀器的SBW 與試樣的自然帶寬（ NBW） 的比率。” （ 自然帶寬被定義為吸收值的1/ 2 處的吸收譜帶寬度）。Knowles 和A. Owen 在大量實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上指出: SBW/NBW≤0. 1 時(shí), 吸光度準(zhǔn)確度可高達(dá)99. 5% ; 如果SBW/ NBW 增大, 則吸光度測(cè)量誤差會(huì)增加。A. Owen 還指出, NBW≥20 時(shí), 2nm 的SBW 對(duì)于吸光度的準(zhǔn)確測(cè)定是足夠的, 可滿足大約99% 的日常分析。這也是我國(guó)藥典規(guī)定用于藥檢的紫外可見分光光度計(jì)的SBW 一定要求≤2nm 的主要原因。
測(cè)量光度準(zhǔn)確度時(shí), 必須注意SBW 的選擇。具體理由是:

    ① SBW 小, 則對(duì)應(yīng)的狹縫寬度小, 此時(shí)的雜散光也小, 可提高吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確度。
    ② SBW 小, 對(duì)同一自然帶寬（ NBW） 來講, 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度會(huì)高。因?yàn)椴煌�的波長(zhǎng)有不同的摩爾吸光系數(shù), 所以, 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度高時(shí), Beer 定律的偏離也會(huì)小, 即光度準(zhǔn)確度測(cè)試誤差小。
    ③ SBW 小, 則對(duì)應(yīng)的狹縫窄, 但單色光的單色性也好, 更能接近單色光, 也可減少Beer 定律的偏離, 提高測(cè)量精度。但必須注意, SBW 不能太小, 否則信號(hào)弱, 儀器的信噪比小, 靈敏度差。
   狹縫寬度是指紫外可見分光光度計(jì)狹縫的機(jī)械寬度。一般來講, 紫外可見分光光度計(jì)的制造者不會(huì)告訴用戶儀器的狹縫寬度, 在某種程度上講, 儀器的狹縫寬度是一個(gè)保密數(shù)據(jù)。但制造商應(yīng)該或必須告訴用戶儀器的光譜帶寬與狹縫寬度的關(guān)系為

 

 

 

    式（ 4-13） 中, f 為焦距; m 為光譜級(jí)數(shù); d 為光柵常數(shù); q 為衍射角（ 有些人用b 表示衍射角）。
    所以, SBW 與單色器物鏡的焦距f 有關(guān), 而狹縫寬度與單色器物鏡的焦距f 無關(guān)。
    必須指出, 光譜帶寬以nm 計(jì), 而狹縫寬度以mm 計(jì), 二者在計(jì)量單位上相差100 萬倍。所以, 那些稱紫外可見分光光度計(jì)儀器的狹縫寬度為多少納米是不對(duì)的。
（ 三） 光度準(zhǔn)確度與波長(zhǎng)重復(fù)性的關(guān)系
    在紫外可見分光光度計(jì)中, 波長(zhǎng)重復(fù)性對(duì)光度準(zhǔn)確度的影響是很大的。在紫外可見分光光度計(jì)中的使用過程中, 如選擇試樣的吸收峰作為測(cè)試波長(zhǎng), 則在重新設(shè)定該波長(zhǎng)時(shí), 產(chǎn)生的微小波長(zhǎng)差對(duì)光度準(zhǔn)確度測(cè)量的結(jié)果影響不大。但如果不是選擇被測(cè)試樣的吸收波長(zhǎng)作為測(cè)試波長(zhǎng), 而是選擇吸收波長(zhǎng)兩側(cè)的波長(zhǎng)λ側(cè)作為測(cè)試波長(zhǎng)（ 見圖4-3 ） , 則同樣大小的波長(zhǎng)誤差會(huì)產(chǎn)生很大的光度準(zhǔn)確度測(cè)量誤差。
    由圖4-3 可知, Δλ1 = Δλ2 , 但ΔA1 n ΔA2 。因此, 在要求高精度測(cè)量時(shí),為了得到更好的光度準(zhǔn)確度, 一定要注意選用波長(zhǎng)重復(fù)性好的紫外可見分光光度計(jì)儀器。并且, 在分析過程中, 特別要注意選擇試樣的吸收峰處的波長(zhǎng)

 

 

 

                     圖4-3 光度準(zhǔn)確度測(cè)量誤差示意
     作為測(cè)試波長(zhǎng), 否則難以得到令人滿意的結(jié)果。
（ 四） 光度準(zhǔn)確度與波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的關(guān)系
    紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是很重要的; 特別在比較儀器時(shí), 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度顯得更加重要。因?yàn)槲镔|(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光吸收時(shí), 有不同的摩爾吸光系數(shù)。摩爾吸光系數(shù)不同, 分析測(cè)試的靈敏度就不同。所以, 同一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì), 對(duì)同一試樣, 不同波長(zhǎng)測(cè)試, 其結(jié)果不一樣。同樣, 兩臺(tái)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度不同的紫外可見分光光度計(jì), 對(duì)同一試樣, 在同一波長(zhǎng)上測(cè)試, 其結(jié)果也會(huì)不同。所以, 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度在某種程度上講, 決定光度準(zhǔn)確度。