一、基線平直度的重要性(對分析測試誤差的影響)
紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲直接影響
儀器的信噪比,它是限制分析檢測濃度下限的主要因素。目前, 各國紫外可見分光光度計(jì)的生產(chǎn)廠商, 給出的整機(jī)光度噪聲都是指儀器在500nm 處的光度噪聲( 稱之為整機(jī)的光度噪聲) , 主要用于比較不同儀器的優(yōu)劣。而紫外可見分光光度計(jì)的使用者往往要在不同波長上使用, 特別要在紫外區(qū)使用。所以, 只給出500 nm處的整機(jī)光度噪聲, 不能滿足使用者的要求。因此, 提出了基線平直度的概念。紫外可見分光光度計(jì)的基線平直度是指每個(gè)波長上的光度噪聲, 它是用戶*關(guān)心的技術(shù)指標(biāo)。它是紫外可見分光光度計(jì)各個(gè)波長上主要分析誤差的來源。它決定紫外可見分光光度計(jì)在各個(gè)波長下的分析檢測濃度的下限。但是很可惜, 目前很多儀器制造者、使用者都還沒有認(rèn)識到或還沒有重視基線平直度這個(gè)技術(shù)指標(biāo)。
二、基線平直度的測試方法
目前, 上對紫外可見分光光度計(jì)的基線平直度的測試方法一般是冷態(tài)開機(jī), 預(yù)熱0. 5h 后, 試樣和參比比色皿都為空氣, 光譜帶寬SBW = 2 nm, 吸光度值為0Ab s , 從長波向短波方向?qū)x器進(jìn)行全波長慢速( 或中速) 掃描。而后, 在全波長范圍內(nèi), 找出峰-峰( P-P) 值中的一點(diǎn), 作為該儀器的基線平直度。
三、影響基線平直度的主要因素
(1 ) 濾光片或光學(xué)元件上有灰塵此時(shí)會產(chǎn)生散射, 從而引起基線平直度變壞。
(2 ) 濾光片未安裝好用于不同波段不同的濾光片切換時(shí)會產(chǎn)生噪聲, 使基線平直度變壞。
(3 ) 光源( 氘燈、鎢燈) 切換時(shí)產(chǎn)生噪聲一 般在340 ~360nm 左右出現(xiàn), 從而使基線平直度變壞。
(4 ) 基線平直度測試時(shí)掃描速度太快也會使基線平直度變壞。作者對國產(chǎn)某品牌紫外可見分光光度計(jì)的基線平直度進(jìn)行了測試, 發(fā)現(xiàn)慢速掃描時(shí)基線平直度為±0. 0005Abs , 中速和快速掃描時(shí), 基線平直度分別為±0. 0014Abs 和±0. 0035Abs。所以, 上約定, 測試紫外可見分光光度計(jì)的基線平直度時(shí), 掃描速度都用慢速。
(5 ) 電子學(xué)方面的噪聲過大也會直接影響基線平直度, 特別是放大器和光電轉(zhuǎn)換元件的噪聲, 對基線平直度的影響更大。
(6 ) 光學(xué)部分未調(diào)整好特別是單色器的光路未調(diào)整好, 會使信號減小,信噪比變小, 使基線平直度變壞。
(7 ) 環(huán)境因素包括振動(dòng)、電場、磁場干擾、電壓不穩(wěn)等, 都會使基線平直度變壞。
四、正確認(rèn)識及使用基線平直度
( 一) 基線平直度與整機(jī)的光度噪聲的主要區(qū)別
1. 物理概念不同
基線平直度: 是指紫外可見分光光度計(jì)儀器全波段內(nèi)每個(gè)波長上的噪聲,與濾光片切換和光源切換有關(guān)。
光度噪聲: 是指紫外可見分光光度計(jì)儀器在500nm 波長上的噪聲, 與濾光片切換和光源切換無關(guān)。
2. 測試時(shí)儀器狀態(tài)不同