1、初步熟悉美析V-1500可見分光光度計(jì)的使用方法。

2、熟悉測繪吸收光譜的一般方法。

3、學(xué)習(xí)如何選擇分光光度分析的實(shí)驗(yàn)條件

二、實(shí)驗(yàn)原理: 1、在pH＝2～9 的溶液中，鄰二氮菲(phen) 與Fe²⁺ 生成穩(wěn)定的紅色配合物，反應(yīng)方程式為：2Fe³⁺+2NH₂OH.HCl→2Fe²⁺+N₂+H₂O+4H⁺+2Cl⁺,其吸收峰在515nm處。根據(jù)朗伯比爾定律：A=Kbc,溶液中濃度與其吸光度之間具有直線關(guān)系，可用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定。

三、實(shí)驗(yàn)步驟：

1、用吸量管吸取0.0ml和5ml鐵標(biāo)準(zhǔn)使用液分別注入兩個50ml容量瓶中，加入1ml鹽酸羥胺溶液，搖勻。再加入2ml領(lǐng)二氮菲水溶液，5ml醋酸鈉水溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，放置10min。

2、取兩支1cm比色皿，先用蒸餾水清洗2-3次再用試液潤洗3-4次，分別將配好的鐵標(biāo)準(zhǔn)使用液注入比色皿，并用鏡頭紙拭去光潔面的試液。以試劑空白（即0.0ml鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液）為參比溶液，調(diào)節(jié)分光光度計(jì)使其在參比溶液中透光率為100%。在440-570nm之間，每隔10nm測一次吸光度，*后測的在510nm附近吸光度。在吸收峰附近，每隔5nm測量一次吸光度，即在505nm與515nm處分別測量一次吸光度。

3、顯色劑用量的確定：在 7 只 50 ml容量瓶中，各加10ml鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液和 20ml鹽酸羥胺溶液， 搖勻。 分別加入 0.2， 0.4，0.6，0.8，1.0，2.0，4.0 ml鄰二氮菲溶液，再各加 5.0 ml乙酸鈉溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。放置10min,以水為參比，在選定波長下測量各溶液的吸光度。以顯色劑鄰二氮菲的體積為橫坐標(biāo)、相應(yīng)的吸光度為縱坐 標(biāo)，繪制吸光度－顯色劑用量曲線，確定顯色劑的用量。

4、鐵標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定：取6個50 ml容量瓶，編序號 為1 2 3 4 5 6 7并分別加入鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(10ug/ml)0.00ml 0.20ml 0.40ml 0.60ml 0.80ml 1.00ml 試樣,鹽酸羥氨(20g/L) 2ml,搖勻。用水稀釋至刻度，搖勻后再放置10min。用1cm比色皿，以空白為參比溶液，在510nm處測量各吸光度。

5、石灰石中試樣鐵的測定：準(zhǔn)確稱取0.4-0.5g于100ml燒杯中，加入少量蒸餾水潤濕，小心滴加3mol/L鹽酸溶液至式樣溶解，轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，用少量蒸餾水淋洗燒杯數(shù)次，一并轉(zhuǎn)移至容量瓶中。按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作步驟，加入各種試劑，測量吸光度。

四、數(shù)據(jù)處理及結(jié)果：

1、不同波長下的吸光度：

 

2、不同顯色劑用量時的吸光度:

體積為2.0時吸光度

 

3、不同濃度的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液時吸光度：（0.29g試樣）

  此圖線性關(guān)系較好

五、討論：

1、在進(jìn)行數(shù)據(jù)測量時波長選擇從大到小的方式進(jìn)行測量，且當(dāng)波長調(diào)整時出現(xiàn)以下情況如（待測波長為510nm但調(diào)整時波長變?yōu)榱?08或更小時，應(yīng)將波長調(diào)為520后再調(diào)為510nm）即為了減小機(jī)械誤差。

2、在運(yùn)用y=ax+b這個公式時r²≥0.98時說明線性關(guān)系較好。六、思考題：

1、加入鹽酸羥氨和醋酸鈉的作用？

答：鹽酸羥氨作用是還原Fe3+,醋酸鈉作用是作為緩沖劑

2：使用美析V-1500可見分光光度計(jì)及比色皿時應(yīng)注意什么問題？

答：取拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光學(xué)表面比色皿不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗滌，也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附著的水或溶液應(yīng)用擦鏡紙或細(xì)而軟的吸水紙吸干，不要擦拭，以免損傷它的光學(xué)表面。

3、吸光度的加和性原則是什么？

答：溶液中總的吸光度等于溶液中各組分吸光度之和。