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UV-1200紫外可見分光光度法測定維生素B12含量
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發(fā)布日期：[2015/7/15 14:45:50] 共閱[11531]次 |
紫外可見分光光度法測定維生素B12含量UV-1800PC紫外可見分光光度法測定維生素B12含量
維生素[U1]B12是含鈷的有機藥物，為深紅色結(jié)晶，又稱為紅色維生素B12或氰鈷胺，是含有主要礦物質(zhì)的維生素。測定維生素B12片劑含量的傳統(tǒng)方法是運用紫外可見分光光度計，以吸光系數(shù)法為測定含量依據(jù)，但是該方法對儀器精密度要求較高。標(biāo)準(zhǔn)曲線法是紫外可見分光光度法中*經(jīng)典的方法，若認(rèn)定一臺儀器，固定 其工作狀態(tài)和測定條件，則該方法可消除因儀器而產(chǎn)生的一些誤差，且操作簡便易行。
1 儀器與試藥
1.1 儀器
UV-1800PC型紫外可見分光光度計（美析中國儀器有限公司）。
1.2 試藥
維生素B12對照品（中國藥品生物制品檢定所）；維生素B12片劑（亨瑞達制藥有限公司，批號060801，060701，061002，060902，070303）。0.8濾膜［AUTOMATIC SCIENCE（TIANJIN） INSTRUMENT CO；LTD］。
2 方法與結(jié)果
2.1 測定波長的選擇
維生素B12吸收光譜上有三個吸收峰：278 nm、361 nm、550 nm。維生素B12在361 nm的吸收峰干擾因素少，吸收又*強，中國藥典規(guī)定以361 nm處吸收峰的比吸光系數(shù)E1%1 cm值（207）為計算含量依據(jù)。本實驗選擇361 nm為測定波長，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法為計算含量依據(jù)。
2.2 溶液的制備
2.2.1 對照品溶液的制備：精密稱定對照品維生素B12 0.0025 g，置于25 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻。將溶解后的溶液放置冰箱中冷藏備用。
2.2.2 供試品溶液的制備：維生素B12片劑為糖衣片，取本品50片，除去糖衣，使其呈現(xiàn)粉紅色，研細，精密稱定研磨樣品，約相當(dāng)于維生素B12 1.25 mg（每片的標(biāo)示量為25.0 μg）,置50 mL容量瓶中，加水35 mL，充分振搖30 min使其溶解，加水稀釋至刻度，密塞，再用力振搖10 min，靜置，取上清液，用0.8 μm的微孔濾膜濾過，濾液放置冰箱中冷藏備用。
2.3 線性關(guān)系
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精取2.2.1項下的儲備液，用水分別按1.5、2、4、6、8、10、15、20倍稀釋，搖勻。在361 nm波長處測定吸光度。
以吸光度A與質(zhì)量濃度c繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程Y=0.0193X+0.048,r=0.9937。結(jié)果表明維生素B12對照品溶液在5.00 μg/mL～100.00 μg/mL范圍內(nèi)質(zhì)量濃度與吸收程度呈良好的線性關(guān)系。
2.4 精密度試驗
精取濃度為100 μg/mL的對照品溶液在361 nm連續(xù)測定5次，測得維生素B12的平均吸光度為2.087，RSD為0.7%（n=5）。RSD數(shù)值較小，說明該方法精密度好。
2.5 穩(wěn)定性試驗
取同一供試品溶液，在冰箱中冷藏2 h、4 h、8 h、12 h、24 h后，按2.7項下含量測定法測定，計算得平均吸光度為0.468，RSD為0.99%（n=5）。結(jié)果表明供試品溶液在冷藏溫度下24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。
2.6 重復(fù)性試驗
精取同一批號樣品，分別按2.2.2項的方法制備一式5份的供試品溶液，按2.7項下含量測定法測定，計算得維生素B12的平均含量為22.6 μg/mL（批號為070303），RSD為 1.08%（n=5），說明該方法有較好的重復(fù)性。
2.7 含量測定
以水為空白，取2.2.2項下的濾液，搖勻，設(shè)定吸收波長為361 nm測定吸光度，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法為計算含量依據(jù)。
維生素B12片劑的標(biāo)示量為25.0 μg，由以上測定結(jié)果可知，山西亨瑞達制藥有限公司生產(chǎn)的維生素B12片劑含量均在標(biāo)示范圍90.0%～110.0%之內(nèi)。RSD較小，說明該廠生產(chǎn)的藥品含量穩(wěn)定。 原創(chuàng)作者：上海美析儀器有限公司 |
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