關(guān)鍵詞: 紫外可見分光光度法; 仲綠原酸;美析儀器www.macylab.com；UV-1100;UV-1200

 

 

 

    目前，測定綠原酸含量的方法很多，常采用毛細管電泳法、HPLC法、可見分光光度法和紙層析-紫外可見分光光度法等。但樣品處理均采用索氏回流提取，后經(jīng)層析分離洗脫等步驟。時間長、效率低。本文采用紫外可見分光光度法測定綠原酸含量，只需超聲波提取一小時。不經(jīng)分離純化而直接測定，具有快速準確、穩(wěn)定性好等特點，適合大批量樣品分析測試。

 

    1 材料與方法

紫外可見分光光度計：UV-1100(美析中國)；超聲波洗滌器：MS-5000(日本)；甲醇(AR)(湖南師大試劑廠)；綠原酸標樣。供試材料杜仲葉于1997年5月采于江埡林場。

 

    2 研究方法

 

    2．1波長的選擇

 

    根據(jù)綠原酸可溶于水、甲醇的性質(zhì)．精密稱取綠原酸標樣10.1mg，用50％甲醇溶液溶解定容至10ml稀釋10倍后予800～200nm范圍內(nèi)掃描，以50％甲醇溶液作參比，在325nm處有吸收蜂。另將綠原酸標準液點條樣于層析紙上，用水作展開劑展開后，于紫外燈下去掉熒光部分(即綠原酸部分)，其余部分用50％甲醇溶液超聲提取l5分鐘，以50％甲醇作參比，在800—200nm范圍內(nèi)掃描，在345nm處有吸收峰，故選定345nm、325nm，為測定波長，其綠原酸吸光值為(△A=A325一A345)。

 

    2．2標準曲線的制備

 

    精密稱取綠原酸標樣適量，用50％的甲醇溶液稀釋成每毫升含綠原酸5.05、10.1、15.15、20. 2、30.3、40.4μg的標準溶液，以50％甲醇溶液作參比．在345nm 325nm處測定A345、A325值，求得A(△A=A325—A345)，以樣品的濃度C(μg／ml)為橫坐標，吸光度△A為縱坐標，繪制A—C標準曲線，求得回歸方程為：C=K△A+B，其中K=66.247，B=一0.5808。

 

    2．3樣品的測定

 

    精密稱取杜仲葉粉0.5000g于6Oml試管中，加入40ml 50％甲醇溶液，放人超聲波洗滌器中超聲提取15min后過濾。濾渣再加入40ml 50％ 甲醇溶液，超聲提取15min，共重復上述操作四次(三個平行)，合并濾液定容至250ml。在紫外可見分光光度計上以50％甲醇為參比，測定A325、A345值，求得綠原酸含量。

 

    3 結(jié)果與分析

 

    3.1 測定結(jié)果

 

    3．2 穩(wěn)定性實驗

 

    將測定的樣品在室溫下放置24小時后再測定其吸光值A變化不大，說明在5O％甲醇溶液中穩(wěn)定。

 

    3．3 回收率實驗

 

    將標樣配成一定濃度加人已溯樣品中．測定其含量，計算回收率。

 

    4 結(jié)論

 

    (1)綠原酸在5.05～40.4μg/ml之間，其吸光度△A=A325一A345與濃度呈良好線性關(guān)系。

 

    (2)采用紫外可見分光光度計測定杜仲葉中綠原酸含量，其穩(wěn)定性好、重復性好，回收率為104.2％。此方法簡便、快速、準確、穩(wěn)定，可用于杜仲葉片綠原酸含量的測定。

 

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