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  技術文章  
 

蜂膠軟膠囊中總黃酮測定方法


發(fā)布日期:[2024/5/21 9:08:13] 共閱[4460]次
         蜂膠是由蜜蜂,特別是工蜂,從植物的樹膠、樹脂中采集,并與上顎腺、蠟腺等分泌物混合形成 的具有黏性的固體膠狀物�,F(xiàn)代研究結果表明,蜂膠含有維生素、酚類、蓓烯類、黃酮類化合物等多種營養(yǎng)保健成分。在蜂膠的眾多活性物質中,黃酮類物質是為關鍵的成分,它具有抗菌、殺毒、 消炎止痛、降血脂、促進機體組織再生和增強機體免疫能力等功效。近年來,蜂膠產品在市場上受到了廣泛的關注和認渴,其種類也日益豐富,主要以膠囊形式呈現(xiàn)。蜂 膠中主要活性成分為黃酮類化合物,已成為研究熱點,且市售的蜂膠膠囊類產品均以總黃酮含量作為評價指標。黃酮類化合物的測定有多種方法,如液相色譜法﹑分光光度法等,液相色譜法可以測定單一的黃酮成分,分光光度比色法可以測定黃酮成分的總量。 紫外分光光度法被廣泛應用于測定蜂膠制品中的總黃酮含量,因為它具有操作簡便、準確度高且易于實施的特點,因此深受廣大研究者的青睞。

實驗方法:根據《蜂膠中總黃酮含量的測定方法分光光度比色法》(GB/T 20574—2006),利用分光光度比色法對蜂膠軟膠囊中的總黃酮進行定量分析。

試劑

蘆丁標準品(含量95.5%,上海安譜璀世標準技術服務有限公司,批號 2251131);

無水乙醇、硝酸鋁、95% 乙醇、醋酸鉀(分析純,南京化學試劑有限公司)

儀器

UV-1800 紫外可見分光光度計(上海美析儀器有限公司);

超聲波清洗儀;

高速臺式離心機;

BT25S 十萬分電 子天平、BSA224S-CW 電子天平。

試樣的制備

稱取蜂膠軟膠囊內容物0.5 g精卻1 mg)于燒杯中,加入95%乙醇約30 mL,室溫下超聲提取20 min,將溶液轉移至50mL的容量瓶中,加入95%乙醇至刻度線,混合均勻后進行過濾,棄去初濾液, 收集濾液待測。準確吸取1.0mL待測溶液于50mL容量瓶中,分別加入1.0 mL硝酸鋁溶液和1.0mL醋酸鉀溶液,加95%乙醇至刻度,搖勻,靜置10 min,3 000 r·min-1離心3min,取上清液待測。空白實驗精密吸取1.0 mL待測溶液于50 mL容量瓶中,加95%乙醇至刻度,搖勻。用1 cm比色皿,在415 nm以空白試液作參比,測定樣品吸光度。

標準溶液制備

稱取10.50mg蘆丁標準品(含量95.5%)于50 mL容量瓶中,用無水乙醇溶解,并定容至刻度,搖勻, 溶液濃度為0.2 g·L-1 。吸取標準溶液0mL、1.00 mL 2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL5.00 mL6.00 mL(相當于蘆丁含量 0 mg、0.2 mg、0.4 mg、0.6 mg、0.8 mg

1.0 mg 1.2 mg),分別置于50 mL容量瓶中,向容量瓶中加入1.0mL硝酸鋁溶液和1.0mL醋酸鉀溶液,用95%乙醇定容至刻度,搖勻,靜置10 min后測定。

結果計算

總黃酮計算公式為

式中:X 為黃酮類化合物的總含量,%;

m1 由標準曲線上查出測定液中蘆丁質量,mg;

m 為樣品的質量,g;

d 為稀釋比例。

 

原創(chuàng)作者:上海美析儀器有限公司

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